上海富衡 | 人B细胞淋巴瘤细胞SU-DHL-2
2025-04-27
️来源与特性
SU-DHL-2源自复发性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的胸腔积液,属活化B细胞样(ABC)亚型,携带BCL-6基因重排(t(3;14))及MYD88 L265P突变,模拟难治性淋巴瘤分子特征。表型CD19/CD20阳性,CD10/CD5阴性,悬浮生长,倍增时间36-48小时,需RPMI-1640培养基(含10-15% FBS)维持。
️核心应用
- ️发病机制:研究BCR信号异常、MYD88-TLR通路激活导致的NF-κB依赖性生存及化疗耐药(如R-CHOP方案耐药)。
- ️靶向治疗:测试BTK抑制剂(伊布替尼)、PI3K抑制剂(Idelalisib)敏感性,评估CD19/CD20靶向CAR-T疗效。
- ️分子研究:通过CRISPR敲除MYD88或BCL-6验证致癌性,单细胞测序分析肿瘤异质性。
️培养要点
- ️传代:直接离心(1500 rpm×5 min)后重悬,密度维持2×10⁵~1×10⁶ cells/mL。
- ️冻存:90% FBS+10% DMSO程序降温,复苏后低速离心(800 rpm×3 min)去除DMSO。
️验证与质控
- 流式检测CD19/CD20阳性率>95%;PCR/测序确认MYD88突变(引物5’-GCTTGAGGAAGGCAGACCC-3’);FISH验证BCL-6重排。
- 功能实验:伊布替尼(IC₅₀≈0.5 μM)抑制增殖,NF-κB报告基因检测活性。
️注意事项
- 避免聚集(可40 μm过滤)及频繁离心;每月支原体检测(Plasmocin™处理污染);关注血清批次差异。
- 对比模型:Raji(Burkitt淋巴瘤,EBV+)、JeKo-1(套细胞淋巴瘤,CD5+)、OCI-Ly3(ABC-DLBCL,MYD88+)。
️研究价值
SU-DHL-2是ABC-DLBCL机制与靶向治疗的核心模型,适用于联合用药(如伊布替尼+Venetoclax)及表观遗传调控(HDAC抑制剂)研究,需结合遗传验证与规范培养确保数据可靠性。