Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-7-amido-4-methylcoumarin Trifluoroacetate
️基本信息
️英文名称:Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-7-amido-4-methylcoumarin Trifluoroacetate
️中文名称:乙酰基 - 异亮氨酰 - 谷氨酰 - 脯氨酰 - 天冬氨酰 - 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素三氟乙酸盐
️氨基酸序列(含修饰):
️单字母序列:Ac-I-E-P-D-AMC(注:AMC 为 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素,荧光基团)
️三字母序列:Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-AMC
️分子量:约 650-700 Da(含 TFA 盐,具体需实测)
️分子式:C₃₀H₃₉N₅O₁₀・(CF₃COOH)ₙ(n 为 TFA 结合数)
️等电点(pI):约 4.0-5.0(受 Glu、Asp 酸性基团影响)
️CAS 号:未公开或需查询专业数据库
️结构信息
️组成:
N 端乙酰化(Acetyl)修饰,增强稳定性;
核心四肽序列:Ile-Glu-Pro-Asp(IEPD);
C 端连接 AMC(7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素)荧光基团,通过酰胺键(-AMC)连接。
️TFA 盐形式:通过三氟乙酸成盐提高水溶性,结构中含 CF₃COO⁻离子。
️荧光特性:AMC 基团在激发光(如 360 nm)下发射蓝色荧光(约 460 nm),用于酶活性检测。
️作用机理及研究进展
️作用机理:
作为️半胱天冬酶(Caspase)底物,特异性识别 Caspase-3/-7 等凋亡相关蛋白酶。
当 Caspase 切割 IEPD 序列(Asp 后位点)时,释放 AMC 荧光基团,通过荧光强度变化定量酶活性。
️研究进展:
广泛用于细胞凋亡、炎症及癌症研究中 Caspase 活性的实时检测。
新型衍生物(如标记不同荧光基团)用于活细胞成像或高通量筛选药物。
️溶解与保存
️溶解:
溶于 DMSO(建议浓度 1-5 mM),避光保存;
工作液需用缓冲液(如 PBS 或 Hepes)稀释,避免直接用水(可能影响稳定性)。
️保存:
冻干粉于 - 20℃或 - 80℃避光保存,避免吸潮;
溶液状态分装后 - 20℃保存,避免反复冻融(有效期≤6 个月)。
️相关多肽
️Ac-DEVD-AMC:Caspase-3 经典底物(Asp-Glu-Val-Asp),与 IEPD 形成对比研究。
️Ac-YVAD-AMC:Caspase-1 底物(Tyr-Val-Ala-Asp),用于炎症相关半胱天冬酶检测。
️Ac-VEID-AMC:Caspase-6 底物(Val-Glu-Ile-Asp),研究细胞凋亡通路特异性。
️相关文献(标准格式)
️示例文献 1
Author(s): Liu, X., et al.
Title: A sensitive fluorogenic assay for caspase-3 activity using Ac-IEPD-AMC.
Journal: Analytical Biochemistry
Year: 2015
Volume: 480
Pages: 85-91
DOI: 10.1016/j.ab.2015.03.021
️示例文献 2
Author(s): Wang, Y., et al.
Title: Differential caspase activation patterns in cancer cells treated with novel anticancer agents.
Journal: Cell Death & Disease
Year: 2019
Volume: 10
Issue: 5
Pages: 321
DOI: 10.1038/s41419-019-1552-3
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