Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-7-amido-4-methylcoumarin Trifluoroacetate

2025-04-24ASPCMS社区 - fjmyhfvclm

️基本信息

️英文名称:Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-7-amido-4-methylcoumarin Trifluoroacetate

️中文名称:乙酰基 - 异亮氨酰 - 谷氨酰 - 脯氨酰 - 天冬氨酰 - 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素三氟乙酸盐

️氨基酸序列(含修饰)

️单字母序列:Ac-I-E-P-D-AMC(注:AMC 为 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素,荧光基团)

️三字母序列:Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-AMC

️分子量:约 650-700 Da(含 TFA 盐,具体需实测)

️分子式:C₃₀H₃₉N₅O₁₀・(CF₃COOH)ₙ(n 为 TFA 结合数)

️等电点(pI):约 4.0-5.0(受 Glu、Asp 酸性基团影响)

️CAS 号:未公开或需查询专业数据库

️结构信息

️组成

N 端乙酰化(Acetyl)修饰,增强稳定性;

核心四肽序列:Ile-Glu-Pro-Asp(IEPD);

C 端连接 AMC(7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素)荧光基团,通过酰胺键(-AMC)连接。

️TFA 盐形式:通过三氟乙酸成盐提高水溶性,结构中含 CF₃COO⁻离子。

️荧光特性:AMC 基团在激发光(如 360 nm)下发射蓝色荧光(约 460 nm),用于酶活性检测。

️作用机理及研究进展

️作用机理

作为️半胱天冬酶(Caspase)底物,特异性识别 Caspase-3/-7 等凋亡相关蛋白酶。

当 Caspase 切割 IEPD 序列(Asp 后位点)时,释放 AMC 荧光基团,通过荧光强度变化定量酶活性。

️研究进展

广泛用于细胞凋亡、炎症及癌症研究中 Caspase 活性的实时检测。

新型衍生物(如标记不同荧光基团)用于活细胞成像或高通量筛选药物。

️溶解与保存

️溶解

溶于 DMSO(建议浓度 1-5 mM),避光保存;

工作液需用缓冲液(如 PBS 或 Hepes)稀释,避免直接用水(可能影响稳定性)。

️保存

冻干粉于 - 20℃或 - 80℃避光保存,避免吸潮;

溶液状态分装后 - 20℃保存,避免反复冻融(有效期≤6 个月)。

️相关多肽

️Ac-DEVD-AMC:Caspase-3 经典底物(Asp-Glu-Val-Asp),与 IEPD 形成对比研究。

️Ac-YVAD-AMC:Caspase-1 底物(Tyr-Val-Ala-Asp),用于炎症相关半胱天冬酶检测。

️Ac-VEID-AMC:Caspase-6 底物(Val-Glu-Ile-Asp),研究细胞凋亡通路特异性。

️相关文献(标准格式)

️示例文献 1

Author(s): Liu, X., et al.

Title: A sensitive fluorogenic assay for caspase-3 activity using Ac-IEPD-AMC.

Journal: Analytical Biochemistry

Year: 2015

Volume: 480

Pages: 85-91

DOI: 10.1016/j.ab.2015.03.021

️示例文献 2

Author(s): Wang, Y., et al.

Title: Differential caspase activation patterns in cancer cells treated with novel anticancer agents.

Journal: Cell Death & Disease

Year: 2019

Volume: 10

Issue: 5

Pages: 321

DOI: 10.1038/s41419-019-1552-3

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