Boc-Leu-Lys-Arg-AMC；Boc-LKR-AMC；CAS No. : 109358-47-6；Kex2 内切蛋白酶 (Kex2 endoprotease) 荧光底物。

基本信息

• 英文名称：Boc-Leu-Lys-Arg-AMC
• 中文名称：叔丁氧羰基 - 亮氨酸 - 赖氨酸 - 精氨酸 - 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素
• 氨基酸序列：Boc-Leu-Lys-Arg-AMC
• 单字母序列：Boc-L-K-R-AMC
• 三字母序列：Boc-Leu-Lys-Arg-AMC
• 分子量：672.82 g/mol
• 分子式：C₃₃H₅₂N₈O₇
• 供应商：上海楚肽生物科技有限公司
• CAS 号：109358-47-6

结构信息

• 化学结构：
• N 端：叔丁氧羰基（Boc）保护基团，增强多肽稳定性。
• 核心序列：三肽 Leu-Lys-Arg，其中 Arg 为 Kex2 内切蛋白酶的特异性切割位点。
• C 端：7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素（AMC），作为荧光报告基团，被切割后释放蓝色荧光（激发 / 发射波长：380 nm/440 nm）。
• 关键特征：
• 切割位点：Kex2 酶识别 Arg 残基的羧基端，水解后释放 AMC。
• 荧光机制：AMC 在游离状态下具有强荧光，用于定量检测酶活性。

功能应用

• 核心功能：
• 作为Kex2 内切蛋白酶的特异性荧光底物，用于酶活性测定和抑制剂筛选。
• 通过 AMC 的荧光强度变化，实时监测酶促反应速率。
• 应用领域：
• 酵母研究：分析 Kex2 在 α- 因子前体加工中的作用（Mizuno et al., 1987）。
• 药物开发：评估抗真菌药物对 Kex2 的抑制效果（如新型蛋白酶抑制剂设计）。
• 基础生物学：研究真核生物蛋白分泌途径的调控机制。

研究进展

• 经典研究：
• Mizuno et al. (1987) 首次报道 Boc-LKR-AMC 用于检测酵母 Kex2 酶活性，验证其底物特异性。
• Mizuno et al. (1989) 进一步优化该底物在酶动力学分析中的应用。
• 近年趋势：
• 结合高通量筛选技术，开发基于 Boc-LKR-AMC 的自动化检测平台，用于快速筛选 Kex2 抑制剂。
• 探索该底物在哺乳动物细胞中检测 Kex2 同源酶（如 PC5/6）的潜力。

溶解保存

• 溶解性：
• 易溶于二甲基亚砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF），浓度可配至 10 mM。
• 微溶于水，需超声或加热助溶。
• 储存条件：
• 短期：4℃避光保存（≤1 周）。
• 长期：-20℃分装保存（避免反复冻融）。

相关多肽

• 同类底物：
• Boc-Leu-Arg-Arg-AMC：用于检测其他丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶）。
• Z-Arg-Arg-AMC：与 Boc-LKR-AMC 结构相似，但 N 端为苄氧羰基（Z）保护。
• 荧光类似物：
• Boc-Lys-Arg-AMC：缩短 Leu 残基，验证底物长度对酶活性的影响。
• FAM-Leu-Lys-Arg-AMC：荧光素标记版本，用于细胞内酶活性成像。

相关文献

1. Mizuno, K., et al. (1987). A membrane-bound, calcium-dependent protease in yeast alpha-cell cleaving on the carboxyl side of paired basic residues. Biochemical and Biophysical Research Communications, 144(2), 807-813.
2. Mizuno, K., et al. (1989). Characterization of Kex2-encoded endopeptidase from yeast Saccharomyces cerevisiae. Biochemical and Biophysical Research Communications, 159(1), 305-310.

仅供实验室科研。